兒童呼吸道感染現(xiàn)狀
WHO的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，下呼吸道感染仍是世界上最致命的傳染病，位居全球主要死亡原因第四位[1]。全球194個(gè)WHO成員國2000年 ~ 2019年5歲以下兒童死亡原因分析顯示，下呼吸道感染是5歲以下兒童（新生兒除外）的首要死亡原因，中國是5歲以下兒童死亡病例數(shù)最高的10個(gè)國家之一[2]。
2019年全球5歲以下兒童死亡原因
呼吸道感染是兒科最常見的疾病之一，占所有兒科疾病首位。呼吸道感染病原譜呈現(xiàn)多樣化，臨床癥狀非特異。上呼吸道感染多由病毒引起，發(fā)病率高，多為自限性疾病，易引起多種并發(fā)癥；下呼吸道感染由病毒、支原體、衣原體、軍團(tuán)菌、細(xì)菌等微生物感染引起，發(fā)病率較上呼吸道感染低，但醫(yī)治費(fèi)用較高。呼吸道感染現(xiàn)狀，病原譜多樣且復(fù)雜，急性呼吸道感染90%以上為非細(xì)菌性，多為非典型性病原體，臨床癥狀非特異；非典型病原體具有感染力強(qiáng)、傳播快、潛伏期短、發(fā)病急、病后免疫力不能持久等特點(diǎn)，常導(dǎo)致較高的發(fā)病率和死亡率，造成疾病的大流行。不同病原感染，診療差異較大。針對不同的病原體，需采用不同的抗感染藥物。
兒童呼吸道檢測現(xiàn)狀
面對頻發(fā)的呼吸系統(tǒng)疾病，其致病微生物復(fù)雜多樣，但癥狀往往相似，有流涕、發(fā)熱、頭痛等癥狀，臨床病例為單一或復(fù)合感染，導(dǎo)致臨床癥狀與普通輔助檢查不具有特異性，不利于鑒別。
2023年12月，《發(fā)熱患兒就診流程規(guī)范化管理專家共識》(下稱《共識》)正式發(fā)布[8]，其提出發(fā)熱門診應(yīng)根據(jù)臨床診療和疫情防控要求合理開展傳染病和兒科常見感染性疾病病原學(xué)檢測項(xiàng)目，尤其是病原學(xué)快速檢測項(xiàng)目。需要重點(diǎn)關(guān)注的兒科急性感染常見病原體，包括：（1）易造成急性呼吸道感染高發(fā)流行的病原體，如甲型和乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、新冠病毒、偏肺病毒、副流感病毒及肺炎支原體等；（2）易造成急性病毒性感染腹瀉的高發(fā)流行病原體，如諾如病毒、輪狀病毒等。
《共識》將病原學(xué)快速檢測項(xiàng)目擺在了重要位置?？焖贆z測項(xiàng)目對于病毒檢測試劑的要求高，而多項(xiàng)病原體聯(lián)檢試劑產(chǎn)品能夠滿足于市場對于快速檢測的需要，同時(shí)呼吸道聯(lián)檢檢測試劑產(chǎn)品能夠縮短患者治療周期，更大程度避免抗生素的濫用。
常見檢測方法
傳統(tǒng)的檢測方法主要包括抗原檢測、抗體檢測、培養(yǎng)分離和核酸檢測等。這些方法各有優(yōu)勢，但也存在一定的局限性
核酸檢測有較高的靈敏性和特異性，受抗菌藥物應(yīng)用影響小，檢測窗口期短，速度快，尤其適用于傳染性病原體如病毒的核酸篩查，或難以培養(yǎng)的細(xì)菌（如結(jié)核分枝桿菌）和非典型病原體的檢測。核酸檢測技術(shù)還可以同時(shí)檢測多種病原體，提高了檢測效率和準(zhǔn)確性。
《兒童呼吸道感染病原體核酸檢測專家共識》表示：核酸檢測方法因具有較高的靈敏度和特異性，得以快速地臨床推廣應(yīng)用，成為呼吸道感染病原體診斷的主要方法[9]。
CRISPR技術(shù)的應(yīng)用
CRISPR技術(shù)在分子診斷領(lǐng)域的應(yīng)用，為兒童呼吸道感染病原體核酸快檢提供了新的解決方案。CRISPR（規(guī)律成簇的短回文重復(fù)序列）是一種在細(xì)菌和古菌中發(fā)現(xiàn)的天然免疫機(jī)制。我們前期文章也介紹了CRISPR系統(tǒng)基于Cas12或Cas13蛋白的反式剪切能力，已被用于開發(fā)快速、靈敏的核酸檢測系統(tǒng)。這些系統(tǒng)不僅具有高特異性和靈敏度，而且操作簡便，有望實(shí)現(xiàn)家庭自測。
在呼吸道感染領(lǐng)域中，通過設(shè)計(jì)特定的CRISPR系統(tǒng)，可以識別并剪切病原體特有的基因序列，且具有高特異性、快速檢測、操作簡便等特點(diǎn)，可以完成一個(gè)樣本同時(shí)檢測多種病原體，且適用于不同樣本類型，從而實(shí)現(xiàn)對呼吸道感染病原體的快速、準(zhǔn)確檢測。
技術(shù)優(yōu)勢
高特異性：CRISPR系統(tǒng)可以針對特定的病原體設(shè)計(jì)，避免交叉反應(yīng)，提高檢測的準(zhǔn)確性。
快速檢測：與傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法相比，CRISPR檢測可以在30min內(nèi)完成，大大縮短了等待時(shí)間。
操作簡便：CRISPR診斷技術(shù)不需要復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，有望實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場快速檢測及居家自測。
成本效益：與傳統(tǒng)的PCR技術(shù)相比，CRISPR技術(shù)減少了昂貴的設(shè)備投入和耗時(shí)的操作步驟，使得大規(guī)模篩查變得更加經(jīng)濟(jì)高效。
未來展望
呼吸道感染的聯(lián)檢技術(shù)正朝著更快速、更精準(zhǔn)、更經(jīng)濟(jì)的方向發(fā)展。CRISPR技術(shù)的應(yīng)用為呼吸道感染的診斷帶來了新的機(jī)遇，有望在未來進(jìn)一步提高檢測的準(zhǔn)確性和效率，為臨床治療提供更有力的支持。CRISPR技術(shù)在呼吸道感染領(lǐng)域的應(yīng)用仍處于發(fā)展階段，但已顯示出強(qiáng)大的市場潛力。
1.家庭自測的便捷性：CRISPR快檢技術(shù)有望實(shí)現(xiàn)家庭自測，對發(fā)病急的患兒可快速了解健康狀況，并及時(shí)采取相應(yīng)措施。
2.基層醫(yī)療的強(qiáng)化：該技術(shù)的應(yīng)用還將強(qiáng)化基層衛(wèi)生防疫能力，提升醫(yī)療服務(wù)效率，尤其是在偏遠(yuǎn)地區(qū)和醫(yī)療資源匱乏的地區(qū)。
3.技術(shù)與服務(wù)的結(jié)合：隨著“互聯(lián)網(wǎng)+醫(yī)療”的發(fā)展，CRISPR核酸快檢技術(shù)可以與在線醫(yī)療服務(wù)相結(jié)合，提供一站式的健康管理解決方案。
未來，隨著技術(shù)的不斷成熟和優(yōu)化，相信CRISPR技術(shù)將在呼吸道感染的診斷和治療中發(fā)揮更加重要的作用，為全球公共衛(wèi)生事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)。
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[1]WHO Fact sheets, the-top-10-causes-of-death. 2020, Dec.
[2]Jamie Perin, et al. Global, regional, and national causes of under-5 mortality in 2000–19: an updated systematic analysis with implications for the Sustainable Development Goals[J]. Lancet Child Adolesc Health, 2022 Feb;6(2):106-115
[3]《流行性感冒診療方案 （2019年版）》
[4]《新型冠狀病毒感染診療方案 （試行第十版）》
[5]《中國兒童肺炎鏈球菌性疾病診斷、治療和預(yù)防專家共識》
[6]《兒童流感嗜血桿菌感染診斷及治療專家建議》
[7]《兒童肺炎支原體肺炎診療指南 （2023 年版）》
[8]《發(fā)熱患兒就診流程規(guī)范化管理專家共識》
[9]《兒童呼吸道感染病原體核酸檢測專家共識》
2022-07-15
2022-11-21
2022-11-23
2022-10-21
2022-03-29
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